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細胞計數(shù)儀計量校準是生物領域中廣泛應用的實驗工具，它可用于細胞濃度、細胞大小、體積等方面的分析。根據(jù)實驗需要，細胞計數(shù)器需要進行校準以確保測量的準確性和可靠性。
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細胞計數(shù)儀是一種快速簡便的自動化細胞數(shù)量和活率測量裝置，目前主要通過基于顯微圖像的圖像識別法和基于阻抗的電阻抗計數(shù)法。
基于顯微圖像的圖像識別法，通常通過臺盼藍染色或AO/PI等熒光染料染色，整合先進的光學成像技術和智能圖像識別技術，進行自動細胞計數(shù)檢測。臺盼藍是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性，以檢測細胞是否存活?；罴毎募毎ね暾?，能排斥臺盼藍，不會被染成藍色；而死細胞由于細胞膜破損或不完整，會被臺盼藍染成藍色，因此可借助臺盼藍染色進行細胞計數(shù)，區(qū)分死活細胞。吖啶橙（AO）和碘化丙啶（PI）是可以與細胞核內雙鏈DNA結合的熒光染料。
AO可以自由穿透細胞膜，嵌入所有細胞（活細胞和死細胞）的細胞核中發(fā)出綠色熒光；PI只能通過破損的細胞膜，即死細胞的細胞膜，嵌入死細胞的細胞核中發(fā)出紅色熒光。當兩種染料同時存在于死細胞核中時，會發(fā)生熒光共振能量轉移，從而導致死細胞發(fā)出紅色熒光。因此可通過AO/PI準確區(qū)分死活細胞，進行準確細胞計數(shù)。
細胞計數(shù)儀計量校準以下校準項目應在細胞計數(shù)儀經(jīng)過開機預熱、儀器達到正常工作條件后進行，校準前應當確保儀器工作狀態(tài)正常，參照附錄 A 進行校準原始數(shù)據(jù)記錄。
1 外觀要求用目視并配合手動操作進行檢查。儀器外表應光滑平整，不應有影響工作性能的機械損傷；顯示屏表面應平整潔凈無劃痕，讀數(shù)清晰；開關及按鍵功能良好。儀器應有以下標識：名稱、型號、編號、生產(chǎn)廠家、出廠日期。
2 測試前準備開啟儀器，參照儀器使用說明書，使儀器達到最佳工作條件。根據(jù)客戶使用要求、被校準儀器的日常工作模式和選取的標準物質類型選取合適的細胞測量模式。
3 空白值 JJF xxxx-xxxx 7取空白稀釋液、純水或蒸餾水進行上樣計數(shù)，測量 4 次，記錄測量值并取其中的最高值作為空白值。
4 示值誤差儀器的示值誤差以細胞濃度（總細胞濃度、活細胞濃度和死細胞濃度）標準物質、細胞活率標準物質、顆粒直徑標準物質測量值與標準值的誤差表示。根據(jù)被校準儀器的日常工作模式選取合適濃度、比例和顆粒直徑的標準物質，使用標準物質前上下顛倒 30-50 次左右從而保證充分混勻（瓶底無沉積物）。用移液器從充分混勻的標準物質樣本液體中間層吸取液體進行上樣計數(shù)，測量 5 次，記錄測量值，并按照公式（1）進行示值誤差計算。CiCs（1）式中：—細胞計數(shù)器示值誤差，/mL、%或 μm； Ci—5 次測量值的平值，/mL、%或 μmCs—標準值，/mL、%或 μm。
5 測量重復性儀器重復性以細胞濃度（總細胞濃度、活細胞濃度和死細胞濃度）標準物質、細胞活率標準物質、顆粒直徑標準物質 10 次測量值的實驗標準偏差表示。根據(jù)被校準儀器的日常工作模式選取合適濃度、比例和顆粒直徑的標準物質，使用標準物質前上下顛倒 30-50 次左右從而保證充分混勻（瓶底無沉積物）。用移液器從充分混勻的標準物質樣本液體中間層吸取液體進行上樣計數(shù)，測量 10 次，記錄測量值，并按照公式
（1）進行示值誤差計算。1( )21nC CSTDnii i
（2）式中：STD-測量值的標準偏差，/mL、%或 μm； n—測量次數(shù)； JJF xxxx-xxxx 8 Ci —第 i 次測量值，/mL、%或 μm； Ci —測量平均值，/mL、%或 μm。8 校準結果表達經(jīng)校準后的細胞計數(shù)儀應填發(fā)校準證書，校準證書應符合 JJF1071-2010 中5.12 的要求，參照附錄 C 給出校準項目名稱、測量值以及擴展不確定度。9 復校時間間隔送校單位可根據(jù)實際情況自主決定細胞計數(shù)儀的復校時間間隔，建議不超過1 年。
公司背景介紹：
澤恒.華譜在計量校準、驗證與確認的優(yōu)勢是專注做生物制藥質控服務，針對一些特殊的儀器都非常熟悉，核心團隊來源于制藥公司和儀器廠家，對儀器和GMP法規(guī)都很熟悉，比如：我們團隊專門研發(fā)了替代進口的熒光定量PCR儀校準裝置，大大降低熒光定量/定性PCR儀校準的成本（遠低于同行）；我們開發(fā)了細胞計數(shù)儀的校準內部規(guī)程；開發(fā)了細胞復蘇儀的內部校準規(guī)程；開發(fā)了凝膠電泳掃描儀的校準規(guī)程；我們開發(fā)了溫度驗證所需要的超低溫和超高溫一體化無線探頭，降低用戶大量使用探頭時的成本，代替了進口；這些例子還有很多，因為我們都是生物出身，所以我們關注每一個生物用戶工藝要求，在生物制藥儀器設備上面專注，“與質量同行、做儀器設備質控"，為了讓生物制藥更安全而努力。
我們在服務上與其它單位密切合作，包括強檢、特檢或做不了的都幫客戶代送代取，省時、省力、方便客戶。
澤恒.華譜是專注于為生物制藥行業(yè)提供實驗室儀器計量校準、儀器設備驗證與驗證/廠房驗證的專業(yè)服務商。我們給制藥客戶解決的是一站式QC/QA/工程部/驗證部/生產(chǎn)部的質控外包服務。
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